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實(shí)驗(yàn)問題
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腸炎模型誘導(dǎo)-葡聚糖硫酸鈉(Dextran Sulfate Sodium Salt,DSS)

發(fā)布者:北京博蕾德生物 發(fā)布時間:2024-12-31 分享到:
腸炎模型誘導(dǎo)-葡聚糖硫酸鈉(Dextran Sulfate Sodium Salt,DSS
背景簡介:
腸炎是一種病因不明的多因素疾病,主要的腸炎有2種,潰瘍性結(jié)腸炎和克羅恩病。潰瘍性結(jié)腸炎主要影響大腸或結(jié)腸,而可能影響胃腸道的任何部分。為了研究潰瘍性結(jié)腸炎,葡聚糖硫酸鈉(DSS)常被用于誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)動物的結(jié)腸炎通過調(diào)整DSS濃度或給藥周期,很容易誘發(fā)急性、慢性或復(fù)發(fā)性結(jié)腸炎。我公司為科研用戶提供用于誘導(dǎo)結(jié)腸炎的右旋糖酐硫酸鈉(DSS),以及評估其特征和并發(fā)癥的工具,用于模擬人結(jié)腸炎。
操作流程:
1)急性腸炎造模:選取成年動物正常飼養(yǎng)1-2周→2-5%DSS自由飲5-7天觀察癥狀體征。
2) 慢性腸炎造模:選取成年動物正常飼養(yǎng)1-2周→2-3%DSS自由飲5-7天觀察癥狀體征→停止飲用DSS,改正常飲水7-14天→重復(fù)2-3%DSS自由飲5-7天觀察癥狀體征→重復(fù)停止飲用DSS,改正常飲水7-14天
3) 灌胃造模:每天分別于10:00, 14:00和18:00給予2%DSS溶液灌胃,每次30ml/kg,不另予飲水。每天末次灌胃后給予足量混合配方顆粒飼料,次日8:00取走飼料。造模時間9天。
常見問題
1. Q: 成功誘導(dǎo)結(jié)腸炎動物模型的關(guān)鍵因素是什么?
A: DSS的分子量、DSS溶液的濃度、動物的種類和品系以及提供給動物的飼料種類。
2. Q: DSS造模的操作流程?
1)急性腸炎造模:選取成年動物正常飼養(yǎng)1-2周→2-5%DSS自由飲5-7天觀察癥狀體征。
2) 慢性腸炎造模:選取成年動物正常飼養(yǎng)1-2周→2-3%DSS自由飲5-7天觀察癥狀體征→停止飲用DSS,改正常飲水7-14天→重復(fù)2-3%DSS自由飲5-7天觀察癥狀體征→重復(fù)停止飲用DSS,改正常飲水7-14天
3) 灌胃造模:每天分別于10:00, 14:00和18:00給予2%DSS溶液灌胃,每次30ml/kg,不另予飲水。每天末次灌胃后給予足量混合配方顆粒飼料,次日8:00取走飼料。造模時間9天。 參考文獻(xiàn):葡聚糖硫酸鈉自由飲用與定量灌胃誘導(dǎo)小鼠急性結(jié)腸炎模型的比較研究,胃腸病學(xué) 2009,14(1),27-30。
3. Q: 誘導(dǎo)結(jié)腸炎動物模型時需要注意哪些條件?
1) 用無菌水配制DSS溶液,詳細(xì)的濃度請參考我們的應(yīng)用指南。使用前,建議使用 0.22 µm的過濾。
2) 每1-2天更換一次新配置的DSS溶液。
3) 為了清楚地觀察造模進(jìn)展, 建議每個籠子2-3只動物,最多不超過每個籠子5只動物。
4) 使所有動物的生存條件一致。
4. Q: DSS引起結(jié)腸炎的原理是什么?
參考文獻(xiàn):Gastroenterology, 2002, 123(1):256-270;J Immunol, 2004, 172(9): 5664-5675; 胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志 2013, 22(12): 1221-1224; 炎性腸病,1998,124-125;J Pharmacol Toxi-colog Methods, 2004, 50(1):81-81
5. Q: 小鼠和大鼠每天的飲水量是多少?
小鼠每天的飲水量為7-10ml,大鼠11ml/100g體重/天。
6. Q: 分子量是否影響結(jié)腸炎模型的建立結(jié)果?
36,000 - 50,000Da是結(jié)腸炎模型建立的最佳DSS分子量范圍。低分子量DSS具有較弱的炎性作用,分子量越大,吸收越困難。
7. Q: 為什么不同批次的DSS使用濃度會有差異?
DSS是葡聚糖聚合物,分子量為平均分子量,每個批次之間會有分子量的差異,而分子量對腸炎造模有影響。通常DSS批間比較穩(wěn)定,但是也有少部分批間差會大一些,所以建議客戶根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)需求,購買足夠的同一批次產(chǎn)品,或者換用批次之前進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)。
8. Q: 小鼠3%的DSS飲用3天后沒有出現(xiàn)明顯的體重下降?
某些動物出現(xiàn)反應(yīng)慢,甚至在飲用DSS第5天才出現(xiàn)體重下降,屬于正?,F(xiàn)象。如果7天未出現(xiàn)明顯癥狀,則重新進(jìn)行實(shí)驗(yàn),并增加0.5-1%的DSS的飲用濃度。
9. Q: DSS造模后出現(xiàn)小腸出血正常嗎?
DSS飲用濃度過高會導(dǎo)致小腸出血,輕度小腸出血無明顯影響,若出血過多,可降低DSS的濃度。
10. Q: DSS飲用后體重下降明顯,但是病理切片HE染色沒有炎癥現(xiàn)象
DSS的飲用達(dá)到一定閾值才能成功誘導(dǎo)腸炎,閾值如果達(dá)不到,體重可以出現(xiàn)下降,但是病理無炎癥表現(xiàn)。
11. Q: 為什么同一籠的小鼠出現(xiàn)的癥狀有差異?
動物之間存在個體差異,不同的動物飲水量可能不同,而且不同的動物對DSS的耐受性也不同。
12. Q: 為什么慢性腸炎模型的第二個周期飲用相同濃度的DSS,動物出現(xiàn)的癥狀沒有第一個周期明顯?
動物飲用DSS一段時間后會有耐受性,所以第二個周期出現(xiàn)癥狀減弱為正?,F(xiàn)象。
13. Q: DSS造模與TNBS造模有什么不同?
TNBS誘導(dǎo)的腸炎與克隆恩病相似,與潰瘍性結(jié)腸炎相似度低。TNBS致炎病程更長,個體差異更大。
14. Q: 是否可以高壓滅菌?
不可以,會導(dǎo)致DSS的分子結(jié)構(gòu)發(fā)生變化。
15. Q: 從DSS誘導(dǎo)小鼠的糞便樣本中提取DNA,結(jié)腸組織中提取的RNA中會有DSS殘留,會抑制下游PCR,RT-PCR實(shí)驗(yàn),如何處理?
精胺可以去除DSS對PCR的抑制。參考文獻(xiàn):Journal of Microbiological Methods ,2018 Jan, 144: 1-7
16. Q: DSS造模期間是否可以進(jìn)行不同時間點(diǎn)的檢測,觀察DSS飲用前期什么時間會造成上皮屏障破壞?
可以,一般2天造成上皮屏障破壞,可以選擇3、5、7天;進(jìn)行病理檢測。
17. Q: 小鼠與大鼠的品系?
小鼠常用品系C57背景純,誘導(dǎo)腸炎更穩(wěn)定。使用Babl/c小鼠時,要做好預(yù)實(shí)驗(yàn);大鼠常用品系SD和Wistar
18. Q: 小鼠的體重建議?
建議按照周齡來選擇,推薦8-12周小鼠,體重約22g左右。
19. Q: DSS可以用于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)嗎?
可以,參考文獻(xiàn):YAP triggers the Wnt/β-catenin signaling pathway and promotes enterocyte self-renewal, regeneration and tumorigenesis after DSS-induced injury. cell death and disease, 2018(9):153
20. Q: DSS可以用超聲進(jìn)行溶解嗎,會破壞其分子結(jié)構(gòu)嗎?
DSS易溶解,無需超聲即可溶解。如果必須使用超聲,也是可以的。
21. Q: DSS除引起結(jié)腸損傷,還會引起肝臟,脾臟損傷嗎?
DSS除導(dǎo)致腸道損傷外,會加速非酒精性肝硬化的進(jìn)展,部分客戶偶爾發(fā)現(xiàn)對正常動物的肝臟也會有損傷,但對脾臟的損傷未見有報道。
相關(guān)產(chǎn)品:
品牌 貨號 英文名稱 中文名稱 規(guī)格
MP Biomedical 160110 DSS 葡聚糖硫酸鈉 10g/50g/100g/500g
Chondrex 4015 DSS 葡聚糖硫酸鈉 20g
Chondrex 4013 FITC-Dextran(4kDa) FITC標(biāo)記的右旋糖苷 25 mg/ml x 5 ml
Chondrex 4009 FITC-Dextran(40kDa) FITC標(biāo)記的右旋糖苷 25 mg/ml x 5 ml
Chondrex 4014 TRITC-Dextran(70kDa) TRITC標(biāo)記的右旋糖苷 25 mg/ml x 5 ml
Chondrex 6601 D-Xylose Assay Kit Assay Kit D-木糖檢測試劑盒 1Kit
 
 

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